PREZENTÁCIA SEKRÉCIE b-GALAKTOZIDÁZY
RASTLINNÝMI BUNKAMI
STANO J., MIČIETA K. 1 , ULBRICH-HOFMANN R. 2 , HAVRÁNEK E. 3 , GRANČAI D. 4 ,
4 Záhrada liečivých rastlín Farmaceutickej fakulty Univerzity Komenského, Bratislava 1 Katedra botaniky Prírodovedeckej fakulty Univerzity Komenského, Bratislava 2 Biochemický ústav Univerzity Martina Luthera, Halle/Salle 3 Katedra farmaceutickej analýzy a nukleárnej farmácie Farmaceutickej fakulty Univerzity 4 Komenského, Bratislava 4 Katedra farmakognózie a botaniky Farmaceutickej fakulty Univerzity Komenského, Bratislava 5 Klinika pracovného lekárstva a toxikológie, Bratislava 6 Katedra farmaceutickej chémie Farmaceutickej fakulty Univerzity Komenského, Bratislava 7 Katedra chemickej teórie liečiv Farmaceutickej fakulty Univerzity Komenského, Bratislava |
|
Souhrn:
Vypracovala sa jednoduchá, citlivá a reprodukovateľná metóda dôkazu extracelulárnej b-galakto-
zidázy. Kalusovou kultúrou, resp. koreňom klíčnych rastlín sekrétovaná b-galaktozidáza hydroly-
zuje substrát (6-bróm-2-naftyl-b-D-galaktopyranozid) na b-D-galaktózu a 6-bróm-2-naftol, ktorý po
simultánnej azokopulácii s hexazotovaným p-rozanilínom, resp. bázickým fuksínom vytvára červe-
nohnedú vo vode takmer nerozpustnú zlúčeninu (diazóniovú soľ). Zafarbenie pod kalusovou kultú-
rou a okolo nej, ako aj koreňa klíčnych rastlín je prejavom činnosti extracelulárnej b-galaktozidázy
študovanými objektmi. Intenzita zafarbenia je mierou ich enzýmovej aktivity. Intracelulárne
lokalizovaný enzým má majoritné, kým extracelulárna b-galaktozidáza minoritné zastúpenie.
Klíčová slova:
sekrécia enzýmu – mrkva – extracelulárna b-galaktozidáza – diazóniová soľ
|
