Příprava bakulovirových transferových vektorů pro in vitro produkci izoenzymů
P4501A1 a P4503A4
ŠAFÁŘOVÁ M., KVASNIČKOVÁ E.
Katedra biochemických věd, Centrum LN00B125, Farmaceutická fakulta UK, Hradec Králové |
|
Souhrn:
Cílem práce je příprava transferových vektorů pro in vitro syntézu mikrozomálních monooxygenas
P4501A1 a P4503A4, které katalyzují oxidační přeměny většiny xenobiotik v organizmu pokusných
zvířat i člověka. cDNA kódující oba proteiny byly získány podle protokolu UBMTA laskavostí
držitelů a namnoženy běžnými metodami. Pro klonování těchto cDNA byly použity bakulovirové
transferové vektory. Tyto vektory obsahují silný polyhedrinový promotor, který je obklopen sekvencemi
homologními s bakulovirovou DNA, umožňující rekombinaci vektoru s virovou DNA, a tím
i produkci zvoleného proteinu. Pro vložení cDNA do vektorů byly použity běžné klonovací postupy
a metoda PCR,úspěšnost vložení cílové sekvence byla ověřena metodou PCRse specifickými primery
a pomocí restrikčních endonukleáz.
Klíčová slova:
P4501A1 – P4503A4 – bakulovirový transferový vektor
|
Objednat toto číslo jako -
FYZICKÁ OSOBA nebo
PODNIKATELSKÝ SUBJEKT
|