Souhrn:
Penicilin G acylasa (PGA) patří k velmi důležitým průmyslovým enzymům, které jsou používány při produkci polosyntetických (3-laktámových antibiotik. Tento enzym katalyzuje hydrolýzu amidické vazby penicilinu G za vzniku 6-aminopenicilánové kyseliny, která slouží jako výchozí substance pro výrobu polosyntetických penicilinů. U kmene Escherichia coli W ATCC 11105 a ATCC 9637 je PGA kódována pga genem na chromozómu a syntetizována jako pre-pro-PGA (pp PGA) prekurzor, který je za pravděpodobné účasti chaperonového systému transportován do periplazmatického prostoru buňky. Zde po řadě proteolytických reakcí vzniká aktivní enzym PGA tvořený dvěma podjednotkami a a R. Exprese pga genu podléhá několika regulačním mechanizmům: teplotní represi, katabolické represi glukosou, represi kyslíkem a indukci fenyloctovou kyselinou (FOK). Tvorba aktivní PGA je také ovlivněna na post-translační úrovni, kde důležitou roli hrají intracelulární proteolytické reakce a transportní systém pre-pro PGA cytoplazmatickou membránou. Chromozomální oblast pga genu kmene E. coli W byla použita pro konstrukci mnoha rekombinantních plazmidy. Těmito plazmidy byly transformovány vhodné hostitelské kmeny, z nichž některé se dnes používají v průmyslu jako vysoko produkční mikroorganizmy.
Klíčová slova:
penicilin G acylasa - syntéza - produkční kmeny - plazmidy
|