Jak dediferencovat hematopoetické kmenové buňky
z umbilikální krve in vitro? Naše první výsledky
s použitím kokultivačních systémů
Uher P.1,2, Hűttelová R.1, Králíčková M.1,2, Novotný Z.2, Rokyta Z.2, Vanderzwalmen P.3, Zech N. 1
1Institut reprodukční medicíny a endokrinologie, Plzeň, vedoucí lékař MUDr. P. Uher 2Gynekologicko-porodnická klinika LF UK a FN, Plzeň, přednosta doc. MUDr. Z. Rokyta, CSc. 3Centre Hospitalier Inter Regional Cavell (CHIREC), Braine l`ąlleud, Brusel, Belgie. |
|
Souhrn:
Cíl studie: Cílem naší práce bylo za pomoci kokultivace dediferencovat lidské hematopoetické kmenové
buňky (HKB), které jsme izolovali z pupečníkové krve.
Typ studie: Prospektivní experimentální studie.
Název a sídlo pracoviště: Laboratoře Institutu reprodukční medicíny a endokrinologie, Plzeň.
Metodika: HKB byly kokultivovány s myšími embryonálními kmenovými buňkami (mEKB), a to jak za
přítomnosti podpůrných buněk, tak bez nich. HKB byly po kokultivaci analyzovány jednak pomocí průtokového
cytometru na přítomnost hematopoetických markerů (CD34, CD45, CD133) a jednak pomocí
imunohistochemie na přítomnost markerů dediferenciace (SSEA-4, Tra-1-60, Tra-1-81).
Výsledky: Ani jedna forma kokultivace s mEKB k dediferenciaci HKB nevedla. Jedinou změnou ve fenotypu
HKB buněk byl pokles intenzity hematopoetických markerů.
Závěr: Domníváme se, že k dediferenciaci nedošlo ze dvou důvodů: nebyl umožněn přímý kontakt buněk
a kokultivovány byly buňky dvou různých živočišných druhů. Naším cílem je pokračovat v pokusech
dediferencovat dospělé kmenové buňky pomocí kokultivačních systémů za použití buněk stejného živočišného
druhu a přímého kontaktu buněk.
Klíčová slova:
hematopoetické kmenové buňky (HKB), myší embryonální kmenové buňky (mEKB),
pupečníková krev, průtoková cytometrie, imunohistochemie
|