„Nested“ PCR a jej využitie pri detekcii
a typizácii papilomavírusovej infekcie
vo vzorkách z cervikálnych lézií
gynekologických pacientok
Kurillová Ľ.1, Šimko J.2, Holomáň K.2, Šuška P.2, Rusnák I.3
1Laboratórium molekulárnej biológie, Bratislava, odborný garant MUDr. RNDr. J. Šimko, PhD. 2II. gynekologicko-pôrodnícka klinika FN, Bratislava, prednosta prof. MUDr. K. Holomáň, CSc3Katedra gynekológie a pôrodníctva SZU, Bratislava, prednosta prof. MUDr. J. Štencl, CSc. |
|
Souhrn:
Cieľ štúdie: Autori testovali variant polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) – „nested“ (N-PCR)
na detekciu ľudského papilomavírusu (HPV) vo vzorkách cervikálnych sterov u gynekologických
pacientok. Táto metodika je založená na opakovanej amplifi kácii špecifi ckých úsekov DNA vírusu.
Porovnávali citlivosť N-PCR s používanou hybridizačnou metodikou. Pozitívne vzorky v druhej
časti pokusov použili na typizáciu detekovaných HPV-DNA pomocou PCR.
Súbor: Účinnosť N-PCR pri detekcii HPV overili na 30 vzorkách z cytologicky/histologicky suspektných
cervikálnych lézií, kde bola predchádzajúca detekcia HPV hybridizačnou metódou neúspešná.
Druhý súbor tvorilo 21 vzoriek odobratých po konizácii, u ktorých sa hybridizačnou metódou prítomnosť
HPV pred zákrokom potvrdila, ale po operácii hybridizácia HPV-DNA bola negatívna.
Výsledky: „Nested“ PCR detekovala prítomnosť HPV-DNA vo všetkých 30 vzorkách (100 %) z prvého
súboru a v 8 vzorkách (38 %) získaných po konizácii.
V 20 prípadoch z prvej série bol typovo-špecifi ckou PCR dokázaný vírus HPV 16, v 6 prípadoch
HPV 18, vo zvyšných 4 prípadoch typizácia zameraná na HPV 16, 18, 31, 33 nebola úspešná. Vo
všetkých 8 vzorkách, kde sa pomocou N-PCR preukázala prítomnosť HPV-DNA po konizácii, sa
typovo-špecifi ckou PCR detekoval HR-HPV 16.
Záver: „Nested“-PCR je v súčasnosti pravdepodobne najcitlivejšou metodikou na detekciu HPV.
Nevýhodou je pomerne zložitý metodický postup a nároky na prístrojové a personálne vybavenie
laboratórií, schopných rutinne využívať túto metodiku.
Klíčová slova:
nested PCR, HPV, detekcia, typizácia
|
Objednat toto číslo jako -
FYZICKÁ OSOBA nebo
PODNIKATELSKÝ SUBJEKT
|