Koncentrace fetálních jaderných erytrocytů
cirkulujících v periferii gravidních žen pro
účely neinvazivní prenatální diagnostiky
Hromadníková I. 1 , Sedláčková L. 2 , Mrštinová M. 3 , Štechová K. 1 , Karamanov
S. 5 , Kofer J. 5 , Macek M. 4
1 II. dětská klinika 2. LF UK, FN Motol, Praha, přednosta doc. MUDr. J. Vavřinec, CSc. 2 Laboratoř imunologie, KlinLab, Praha 3 Gynek.-porod. klinika FN Motol, Praha, přednosta doc. MUDr. K. Citterbart, CSc. 4 Oddělení lékařské genetiky, FN Motol, Praha, přednosta prof. MUDr. P. Goetz, DrSc. 5 Oddělení lékařské genetiky, Masarykova nemocnice, Ústí nad Labem, přednosta MUDr. J. Kofer |
|
Souhrn:
Cíl studie: Koncentrace jaderných erytroblastů cirkulujících v periferní krvi gravidních žen pro
účely neinvazivní prenatální diagnostiky.
Typ studie: Pilotní studie.
Název a sídlo pracoviště: II. dětská klinika 2. LF UK, Fakultní nemocnice Motol, Praha, Česká
republika.
Metodika: Z 13 - 28 ml periferní krve 78 gravidních žen v rozmezí 13. - 37. týdnu gravidity byly
izolovány mononukleární buňky. Mateřské leukocyty byly odstraněny z frakce mononukleárních
buněk pomocí anti-CD14 a anti-CD45 monoklonálních protilátek značených superparamagnetic-
kými částicemi metodou magnetické separace buněk (MACS) na zařízení VarioMACS. Jaderné
erytroblasty byly následně koncentrovány z CD14 - /CD45 - frakce pozitivní selekcí pomocí anti-
CD71 monoklonální protilátky na zařízení MiniMACS. Jednotlivé frakce byly analyzovány tříba-
revnou analýzou na průtokovém cytometru (FACS).
Výsledky: U 68 těhotných žen z 78 testovaných (87 %) byly nalezeny po dvojité magnetické separa-
ci buněk (doubleMACS) zahrnující depleci leukocytů a pozitivní selekci jaderné erytroblasty
v rozmezí 2x10 5 - 1,02 x 10 6 . Faktor celkového zkoncentrování se pohyboval v rozmezí 4,2 - 526,0
(Ć 138,4). Z našeho souboru vyšetřených je patrné, že počet CD71 + jaderných erytroblastů koncen-
trovaných metodou doubleMACS je značně individuální. Jaderné erytroblasty cirkulující v krev-
ním oběhu gravidních žen bylo možno zkoncentrovat již v 13. týdnu gravidity.
Závěr: Naším cílem je vypracovat a standardizovat metodu koncentrace jaderných erytroblastů
cirkulujících v periferii gravidních žen a ověřit možnost použití tohoto alternativního zdroje pro
účely neinvazivní prenatální diagnostiky.
Klíčová slova:
jaderné erytroblasty, MACS, FACS, prenatální diagnostika, fetální buňky
|