Vtéto prospektivní studii shrnujeme naše zkušenosti se zavedením nové neinvazivní metody prenatální diagnostiky RHD genotypizace plodu z periferní krve těhotných žen s využitím PCR v reálném čase a specifických primerů a TaqMan sond pro exon 7 a exon 10 RHD genu. Celkem jsme analyzovali 46 vzorků od 39 RhD negativních těhotných žen (z toho 5 aloimunizovaných: 1x anti-D, 2x anti-D a anti-C a 2x přítomnost nespecifických protilátek v enzymatickém testu). Výsledky neinvazivní prenatální RHD genotypizace plodu provedené na DNA extrahované z periferní krve matek jsme korelovali s výsledky imunohematologické analýzy pupečníkové krve po porodu dítěte. Výsledky genotypizace plodu v oblasti exonu 7 RHD genu byly ve shodě s vyšetřením pupečníku u všech těhotných žen, které doposud porodily (n = 20, z toho 12 RhD pozitivních a 8 RhD negativních dětí). V případě genotypizace plodu v oblasti exonu 10 RHD genu jsme nedetekovali RhD pozitivitu plodu u 10 z 12 těhotenství. Předpokládáme, že tyto dva falešně negativní výsledky mohly být způsobeny částečnou delecí nebo aberacemi RHD genu v 3´ netranslatované oblasti exonu 10, kde se specifické primery a TaqMan sonda váží k cílové DNA. Specificita metody pro oba RHD (exon 7 a exon 10) RQ-PCR systémy dosáhla 100 %, jelikož jsme v periferní krvi těhotných žen, které porodilyRhDnegativní děti (n = 8),nedetekovali žádné RHD pozitivní amplifikační signály. Neinvazivní predikce RhD statutu plodu je rychlá a spolehlivá a může být zahrnuta do rutinních vyšetření prenatální diagnostiky. Pro spolehlivou diagnostiku však doporučujeme, aby byla vždy prováděna amplifikace alespoň dvou různých oblastí RHD genu. Neinvazivní prenatálníRHD genotypizace plodu umožňuje identifikaci plodů v riziku hemolytického onemocnění. Doporučujeme, aby byl v průběhu těhotenství u každé RhD negativní ženy vyšetřen neinvazivně RHD genotyp plodu, nejlépe v I. nebo II. trimestru, a to i u nesenzibilizovaných těhotenství, kterých je většina.

        Klíčová slova: fetálníDNA,hemolytické onemocnění plodu, kvantitativníPCR v reálnémčase, mateřská plazma, RHD gen