Elektroforetická analýza (SDS PAGE) ovulačního
cervikálního hlenu pacientek s poruchou fertility
a po neúspěšné IVF
Cibulka J.1, Ulčová-Gallová Z.2, Babčová K.1, Krauz V.3, Balvín M.3, Bibková K.2, Mičanová Z.2, Rokyta Z.2
1Lékařská fakulta UK, Plzeň 2Gynekologicko-porodnická klinika LF UK a FN, Plzeň, přednostka doc. MUDr. Z. Ulčová-Gallová, DrSc.3Ústav soudního lékařství LF UK, Plzeň |
|
Souhrn:
Cíl studie: Stanovení antispermatozoálních protilátek (ASA) a elektroforetická analýza (SDS PAGE) cervikálního
ovulačního hlenu (OCM), za účelem porovnání výsledků Kremerova penetračního testu
(mucus sperm capillary penetration test) a nepřímého MAR (indirect mixed antiimmunoglobulin reaction)
testu s elektroforetickou analýzou SDS PAGE.
Typ studie: Retrospektivní studie.
Název a sídlo pracoviště: Gynekologicko-porodnická klinika LF UK a FN Plzeň.
Soubor a metodika: Do studie jsme zařadili 94 pacientek (22–40 let, průměrný věk 32,3 roku), kterým
jsme v Poradně reprodukční imunologie Gynekologicko-porodnické kliniky LF UK v Plzni odebrali ovulační
cervikální sekret (OCM). V OCM jsme vyšetřovali antispermatoidní protilátky (ASA) pomocí
Kremerova testu a nepřímého MAR-testu pro IgG, IgA, IgM a IgE. Pro polyakrylamidovou gelovou
elektroforézu (PAGE) jsme připravili OCM inkubací se vzorkovým pufrem s obsahem denaturačního
činidla (SDS) a sledovali jednotlivé bílkovinné frakce.
Výsledky: Penetrace spermií v kapilárách naplněných ovulačním hlenem (Kremer test) dosahovala hodnot
od 0 do 10 cm za hodinu (průměrná hodnota u žen bez ASA 2,43 cm/hod., u pacientek s ASA pak 1,4
cm/hod.). Výskyt spermaglutinačních protilátek nad 45 % v IgA jsme prokázali u 6 (6,38 %) pacientek,
v IgG u 5 (5,32 %), u 5 žen (5,32 %) jsme zjistili sperm-cytotoxické protilátky, přítomnost IgE jsme našli
ve 3 případech (3,19 %) do 30%, IgM aktivitu vůbec. Individuální spektra bílkovin získaných metodou SDS PAGE vykazovala hodnoty molekulových hmotností v rozsahu 14,4–350 kDa. Metodou SDS PAGE
jsme zachytili přítomnost protilátek v IgG a /nebo v IgA v 53 případech (56,38 %): u 40 (75,47 %) jsme
neprokázali jejich ASA aktivitu i-MAR testem, u 13 ano (24,53 % korelace s i-MAR testem); 6 ASA pozitivních
pacientek (31,58 %) metoda neodhalila.
Závěr: Analýza 94 OCM metodou SDS PAGE ukázala některé signifikantní korelace, jejichž specifikace
bude založena na dalším výzkumu typu immunoblottingu.
Klíčová slova:
ovulační cervikální hlen, sterilita, IVF, SDS PAGE
|