Cíl práce: Detekce pohlaví fetu z koncentrované frakce jaderných erytrocytů (NRBC), cirkulují- cích v periferní krvi gravidních žen. Metodika: Z 13 - 28 ml periferní krve 32 gravidních žen v rozmezí 16. - 40. týdne gravidity byly koncentrovány jaderné erytrocyty pomocí dvojité magnetické separace buněk (double MACS). NRBC byly koncentrovány pomocí anti-CD71 monoklonální protilátky, značené superparamagne- tickými částicemi (microbeads) po předchozím odstranění mateřských leukocytů pomocí anti- CD14 a anti-CD45 microbeads. Pohlaví fetu bylo určeno na frakci koncentrovaných NRBC metodou dvoubarevné fluorescenční in situ hybridizace (FISH) s použitím X a Y specifických sond. Výsledky neinvazivního vyšetření byly konfirmovány s výsledky klasické cytogenetické analýzy. Výsledky: Metoda FISH prokázala přítomnost mužských fetálních buněk ve frakci jaderných eryt- rocytů koncentrovaných z periferní krve těhotných žen v 15/17 případech s potvrzeným mužským pohlavím fetu. U 15 testovaných těhotných žen s prokázaným ženským pohlavím fetu byly meto- dou FISH nalezeny ve frakci koncentrovaných jaderných erytrocytů pouze buňky se dvěma X signály. Závěr: Jaderné erytrocyty, cirkulující v krevním oběhu gravidních žen mohou být použity jako alternativní neinvazivní zdroj detekce pohlaví fetu bez rizika falešných pozitivit, ale s rizikem falešně negativních výsledků (2/17, 12 %). Problém falešné negativity je možno odstranit dokona- lejšími separačními technikami fetálních buněk a zdokonalením metod přípravy skel pro FISH.

        Klíčová slova: jaderné erytrocyty, MACS, prenatální diagnostika, fetální buňky, FISH