Nedávno publikovaná studie naznačila možnost využití nově sledovaného biomarkeru, močového peptidu obsahujícího v molekule hydroxyprolin, v oblasti laboratorních vyšetření kostní resorpce za účelem diagnostiky osteopatií. Autoři studie vypracovali jednoduchý a rychlý postup stanovení tohoto nespecifikovaného peptidu v ranní nehydrolyzované moči technikou HPLC s fluorimetrickou detekcí. Postup byl založen na dvojí derivatizaci v HPLC známými a používanými činidly OPA a FMOC, která byla přidána v rychlém sledu v uvedeném pořadí do téhož vzorku. Prvé činidlo reaguje jen s primárními aminoskupinami a ponechává tak druhému činidlu pouze možnost reagovat s iminoskupinami příslušných sloučenin, tj. prolinu, hydroxyprolinu, sledovaného peptidu a také 3,4-dehydroprolinu (interní standard). Tím je umožněna tvorba produktů odlišně fluoreskujících a nastavením odpovídajících vlnových délek jsou pak detekovány jen analyty s iminoskupinami. Vzorky moče stovek náhodně vybraných subjektů byly analyzovány na obsah peptidu a po hydrolýze moče rovněž na obsah hydroxyprolinu, hodnoty byly vztaženy na kreatinin. Byla nalezena vysoká korelace mezi oběma látkami (r 0,972), což postulovalo závěr, že podstatně jednodušší postup, jež stanovení peptidu vyžaduje, by mohl suplovat stanovení zmíněné aminokyseliny. Předmětem tohoto sdělení je alternativní postup, který jsme vedle publikované metody vypracovali pro stanovení peptidu technikou kapilární plynové chromatografie (GC). Tato technika vyžaduje předchozí chemickou modifikaci molekuly, jež se provede chlormravenčanem ethylnatým (ECF) ve vodném prostředí stejně rychle a účinně jako při použití FMOC v HPLC. Před vlastní derivatizací byly aminokyseliny z moče izolovány snadným postupem na malém množství měniče kationtů, přičemž k eluci látek z kolonkybylo použito reakční médium následné chemické reakce. Celý postup přípravy vzorku a vlastní analýzy činí přibližně 15 min a je tedy stejně rychlý jako stanovení HPLC. Korelace mezi oběma způsoby stanovení poskytla hodnotu r = 0,944 a peptid byl identifikován jako dipeptid prolinu s 4-hydroxyprolinem (PHP).

        Klíčová slova: PHP-dipeptid, marker kostní resorpce, GC stanovení, GC vs HPLC stanovení.