Určování krevního systému AB0 z tepelně
degradovaných krevních stop na sérologické
a molekulárně genetické úrovni
Zachová M.1, Zelený M.2, Pexa T.2, Mazura I.1, Hirt M.2
1Katedra antropologie a genetiky člověka, Přírodovědecká fakulta Karlovy univerzity v Praze, Česká republika2Ústav soudního lékařství, Fakultní nemocnice u sv. Anny v Brně, Česká republika |
|
Souhrn:
Určování krevního systému AB0 stále patří k základním laboratorním úkolům nejen v tzv. forenzních
případech. Pokud jsou však analyzované vzorky nějakým způsobem degradované, může při
jejich zpracování docházet k nejrůznějším problémům.
Od šesti dobrovolníků (třech žen a třech mužů) byly odebrány vzorky srážlivé krve, ze kterých
byly následně na sterilní bavlněné čtverečky vytvořeny krevní skvrny. Krevní skvrny byly inkubovány
při třech různých teplotách (22 °C, 37 °C, 56 °C) po různá časová období (1 den, 1 týden, 14
dní, 1 měsíc, 3 měsíce, 6 měsíců, 1 rok). Krevní skvrny degradované při 22 °C jsme analyzovali také
po 3,5 hodinách inkubace. Pro doplnění jsme se pokoušeli určit krevní skupinu AB0 po tepelné
degradaci při vysoké teplotě, a to při 200 °C po dobu 10 min.
Pro určení krevního systému AB0 na molekulárně genetické úrovni byla použita polymerázová
řetězová reakce k amplifikaci určitého úseku genu pro glykozyltransferázu a ze sérologických
metod metoda smíšené aglutinace a vysycovací metoda dle Therkelsena.
Vzhledem k pokroku v molekulárně genetických metodách se předpokládalo, že tyto metody vyřeší
problém také s různě degradovanými vzorky. V této práci však bylo zjištěno, že klasické sérologické
metody mohou být v některých případech úspěšnější.
Klíčová slova:
systém AB0 – analýzy DNA – glykozyltransferáza – smíšená aglutinace – vysycovací
metoda dle Therkelsena
|