Cíl práce: Familiární adenomatózní polypóza (FAP) je autozomálně dominantně dědičné onemocnění charakterizované vývojem stovek až tisíců adenomatózních polypů v kolorektální oblasti. V téměř 100 % případů dochází k jejich karcinomatózní přestavbě. Tato transformace je způsobena zárodečnými mutacemi APC genu. Projekt se zabýval optimalizací podmínek pro diagnostiku mutací způsobujících předčasné ukončení translace a vznik zkráceného, nefunkčního proteinu. Metodika: Pro stanovení byl použit Protein Truncation Test, umožňující detekci zkrácených proteinů na základě in vitro transkripce/translace výchozí DNA sekvence sledovaného genu, amplifikované pomocí polymerázové řetězové reakce (PCR). Proteiny jsou separovány polyakrylamidovou gelovou elektroforézou, přeblotovány a chemiluminiscenčně vizualizovány. Výsledky: Provedena optimalizace podmínek amplifikace cílové oblasti APC genu a in vitro transkripce/translace s následnou detekcí zkráceného proteinu. Dále byly zvoleny kritéria výběru osob, testovaných na přítomnost mutace v cílové oblasti. Funkčnost systému byla ověřena testováním pacientů s klinicky diagnostikovanou FAP. Závěry: Protein Truncation Test je účinným nástrojem pro presymptomatickou diagnostiku familiární adenomatózní polypózy. V současnosti lze jeho použitím potvrdit či vyloučit přítomnost více než 70 % všech mutací v APC genu, způsobujících tvorbu zkráceného proteinu.

        Klíčová slova: polyposis coli gen (APC gen) – familiární adenomatózní polypóza (FAP) – protein truncation test (PTT)