Parametry kvality kryokonzervovaných erytrocytů
rekonstituovaných v roztoku AS-3 (Nutricel)
Bohoněk M.1, Petráš M.1, Turek I.1, Urbanová J.1, Hrádek T.1, Staropražská V.1, Koštířová J.1, Horčičková D.1, Duchková S.1, Svobodová J.2, Tejčková E.2
1Oddělení hematologie, biochemie a krevní transfuze, Ústřední vojenská nemocnice, Praha 2Oddělení nukleární medicíny, Ústřední vojenská nemocnice, Praha |
|
Souhrn:
Souhrn
Práce je dílčím výsledkem projektu, jehož cílem byl vývoj a zavedení metodiky získávání a dlouhodobého skladování
erytrocytů pro strategické, speciální a léčebné potřeby Armády České republiky a státu. Jako základní zkoumaná
metoda bylo zvoleno mražení erytrocytů, získaných metodou dvojité erytrocytaferézy, ve vysoké koncentraci glycerolu
při -85 °C a teplotě skladování -65 °C a nižší. Glycerolizace a deglycerolizace erytrocytů, včetně jejich závěrečné
resuspenze v Nutricelu (AS-3), byla prováděna uzavřeným a automatizovaným systémem na zařízení Haemonetics
ACP 215. Stabilita EAK rekonstituovaných v AS-3 byla ověřena jak klinickým hodnocením u zdravých dobrovolníků
pomocí tzv. indexu terapeutické účinnosti, tak biochemickými a hematologickými parametry. Rekonstituované
erytrocytární jednotky byly hodnoceny ve dnech 0, 7, 14 a 21 po rozmražení 51Cr značenými erytrocyty ve dvou
skupinách: mražené a skladované v primárních vacích (skupina A) a mražené a skladované po přepuštění do speciálních
vaků pro hluboké zmražení (skupina B). Bylo měřeno 24hodinové přežívání autologních erytrocytů podávaných
zdravým dobrovolníkům a stanoven index terapeutické účinnosti (ITE) za pomoci tzv. freeze-thaw-wash-recovery
(FTW%) závislého na množství hemoglobinu v odpadu po promytí rozmražených erytrocytů. Celkem bylo
zmraženo, rekonstituováno a takto vyšetřeno 104 TU erytrocytů. Hodnocené erytrocyty v obou skupinách vykazují
téměř shodné hodnoty ITE: 74,01 (±CI95 %: 71,97–76,04) a 74,02 (±CI95 %: 71,18–76,87) bez ohledu na délku sledované
doby uchovávání po rekonstituci (21 dní). U skupiny B bylo zjištěno 4% snížení hodnoty přežití po 24 hod.
a 4% zvýšení hodnoty FTW%. Hodnoty hemolýzy na konci doby skladování byly u všech hodnocených skupin nižší
než 1 %. Z hematologických a biochemických parametrů byly sledovány změny hemoglobinu, hematokritu, leukocytů,
hemolýzy, osmolality, pH, K, P, ATP, NH3 a 2,3-DPG. Také výsledky měření těchto laboratorních parametrů prokázaly
dobrou použitelnost zmražených erytrocytů ještě 3 týdny po rozmražení, rekonstituci v Nutricelu a uchovávání
při teplotě 2–6 °C.
Klíčová slova:
kryokonzervace erytrocytů, hluboko zmražená krev, rekonstituce, glycerolizace, deglycerolizace,
krizová krevní politika, Nutricel, AS-3, dvojitá erytrocytaferéza
|