Exprese apoptotických proteinů ve
sliznici jejuna u nemocných s celiakií
Kolek A.1, Ehrmann J. jr.2, Lísová S.2, Koďousek R.3, Drábek J.4, Heřmanová Z.4, Zapletalová J.5, Kolář Z.2
1 Dětská klinika 2 Laboratoř molekulární patologie 3 Ústav patologické anatomie 4 Imunologický ústav5 Ústav biofyziky FN a LF UP v Olomouci |
|
Souhrn:
Cíl: Vilózní atrofie jejunální sliznice je u celiakie vyvolána autoimunní reakcí zprostředkovanou T-buňkami
podmíněnou konzumací lepku. Byly podány důkazy, že zánik enterocytů je výsledkem vystupňované apoptózy.
Cílem studie byla analýza exprese proteinů regulujících apoptózu ve sliznici tenkého střeva a částečné objasnění
apoptotických mechanismů vedoucích k rozvoji slizničních změn.
Pacienti a metody: Byly vyšetřeny v parafínu zalité vzorky jejunální sliznice u 25 neléčených nemocných
s aktivní celiakií (AC), 18 s latentní (LC) a u 21 kontrol. Celiakie byla diagnostikována podle kritérií ESPGHAN.
K detekci proteinů byla užita standardní nepřímá imunohistochemická technika. Byly detekovány
proteiny Fas, Fas-L, tkáňová transglutamináza (tTG), kaspázy 3 a 8 (CAS 3 a 8) a proteiny Bcl-2, BID a PARP.
Exprese proteinů byla hodnocena semikvantitativně. Statistická analýza byla provedena chí-kvadrát testem.
Výsledky: Na enterocytech u AC bylo procento Fas pozitivity signifikantně nižší (p < 1 × 10-7) ve srovnání
s kontrolami a LC. Exprese CAS-8 byla signifikantně vyšší (p < 0,04) u AC a u kontrol ve srovnání s LC.
Exprese BID byla nejvyšší u LC ve srovnání s AC a kontrolami (p < 0,01). U lymfocytů lamina propria bylo
procento Fas pozitivity u AC signifikantně nižší (p < 0,003) ve srovnání s LC. Fas-L exprese byla signifikantně
vyšší (p < 0,003) u AC a LC než u kontrol. Nalezli jsme signifikantně více (p < 0,005) Bcl-2 negativních
lymfocytů u AC než u LC a kontrol. Exprese BID byla nejvyšší u AC ve srovnání LC a kontrolami (p <
0,00001). V intraepiteliálních lymfocytech (IEL) byla u LC zjištěna vyšší exprese BID ve srovnání s AC a kontrolami
(p < 0,02) a nižší exprese PARP ve srovnání s AC a kontrolami (p < 0,02).
Závěr: Nálezy ukazují na význam Fas/Fas-L, Bcl-2 a dalších proteinů pro modulaci apoptózy u celiakie. Zvýšená
apoptotická eliminace IEL u LC by mohla částečně vysvětlit, proč u této formy nedochází k rozvoji vilózní
atrofie jejunální sliznice. Výsledky zvýšení exprese tTG vyžadují adekvátní interpretaci v závislosti na expresi
jednotlivých buňkách a tkáních. Jednak mohou být znakem časné fáze apoptózy, ale také výrazem patogenetické
role u celiakie.
Klíčová slova:
celiakie – apoptóza – Fas – Fas-L – CAS 3,8 – Bcl-2 – BID – PARP
|