Identifikace a stanovení volných radikálů ve
vzorcích lidských vlasů metodou EPR
spektroskopie
Stopka P.1, Havlíčková M.2, Křížová J.1, Arenberger P.2, Votruba M.3
1Ústav anorganické chemie, Akademie věd ČR, Řež 2Dermatologická klinika Fakultní nemocnice Královské Vinohrady, Praha 3Mi-Vo-La consulting Praha |
|
Souhrn:
Odkrytá kůže a vlasy jsou bezprostředně ohroženy UV zářením, které je nejsilnějším vnějším zdrojem volných
radikálů. V obou případech tvoří ochranu přirozené barvivo melanin, které je antioxidantem scavangerového
typu; eliminuje vliv UV záření, ale samo se stává volným radikálem. Množství a tím také funkce melaninu jsou
závislé na stavu melanocytů. V případě nemocí dochází k narušení cyklů melanogeneze. Zajímalo nás, jak se vliv
tohoto procesu projeví na velikosti signálu volných radikálů.
Osm vzorků lidských vlasů, od sedmi žen a jednoho muže, vesměs pacientů dermatologické kliniky – vlasové
poradny, jsme zpracovali optimální metodou pro identifikaci a stanovení volných radikálů, kterou je spektroskopie
elektronové paramagnetické rezonance (EPR).
Přístrojem byl Spektrometr typu Bruker Elexsys E-540 (Bruker-Biospin, Rheinsteten, SRN), magnetické pole
bylo měřeno pomocí 1H-NMR magnetometru.EPR spektra byla zaznamenávána jako první derivace absorpčního
spektra, pro výpočty a znázornění spekter byly použity počítačové programy Origin, WINEPR (Bruker, Rheinsteten,
SRN). Dále byly využívány internetové databáze z NIEHS (Bethesda, Maryland, USA).
Byly použity běžné laboratorní chemikálie čistoty p. a. (Sigma-Aldrich), redestilovaná voda a standardy pro
kalibraci spekter (Galenus GmbH, Berlin, SRN).
Výsledná spektra volných radikálů prokázala úzkou souvislost mezi diagnózou pacientů a velikostí, respektive
druhem signálu. Kromě signálů melaninových radikálů jsme našli též signály radikálů manganu a železa.
Ze získaných výsledků lze učinit tyto závěry:
– vzorky vlasů s podobnou nebo stejnou diagnózou vykazují stejný nebo podobný signál,
– aplikace UV záření vede ke zvýšení množství volných radikálů a ke zvětšení signálů,
– radikály železa a manganu mohou pocházet z použitých kosmetických prostředků, mohou být součástí
produkce volných radikálů nebo mohou být projevemzvýšeného transportu těchto kovů vlasy. Odpovědi na tuto
otázku budou předmětem dalšího zkoumání.
Klíčová slova:
vlasy, volné radikály, EPR, melanin, železité ionty, manganaté ionty.
|