Na úvodní stránku ČLS JEP ČESKÁ LÉKAŘSKÁ SPOLEČNOST J. Ev. PURKYNĚ
Časopisy - Článek
Na úvodní stránku ČLS JEP Aktuality O Společnosti O nakladatelském středisku Časopisy Vyhledávání Knihy Supplementa Katalog
 
  Anglicky / English version Čes.-slov. Patol., 39, 2003, No. 1, p. 6 - 10
 
Apoptóza - vybrané metody detekce apoptózy a asociovaných regulačních faktorů na tkáňových řezech z nádorového materiálu 
Pavlovský Z., Vagunda V. 

Oddělení patologie, Masarykův onkologický ústav, Brno
 


Souhrn:

       K detekci apoptózy (AP) na tkáňových řezech lze využít morfologické hodnocení AP figur světelnou či elektronovou mikroskopií a imunohistochemický průkaz antigenů asociovaných s AP. Bcl-2 u řady nádorů inverzně koreluje s AP a je nepřímým markerem počtu AP figur. Imunohistochemický průkaz je bezproblémový. Tkáňovou transglutaminázu, která je výrazně exprimována i v neapoptotických buňkách, nelze považovat za specifický marker AP. Podobně FAS, jehož exprese nemusí být bezpodmínečně spojena se vstupem buňky do AP. Kaspázy: v současnosti používaná imunohistochemická detekce nerozlišuje aktivní a neaktivní formy těchto enzymů. Anexin V: technika, detekující fosfatidylserin, normálně lokalizovaný na vnitřní straně buněčné membrány, jenž je při apoptotickém procesu detekovatelný i extracelulárně. Průkaz Anexinu V značeného koloidním zlatem lze využít k detekci AP imunoelektronovou mikroskopií, nicméně jde o velmi náročnou metodiku. TUNEL, ISEL, ISNTA jsou metody, které označují zlomy DNA vznikající při apoptóze. TUNEL ve srovnání s morfologickým hodnocením AP figur detekuje o cca 20 % apoptotických buněk více. Označeny mohou být i fragmenty DNA vznikající v jádrech během reparace, po elektrokoagulaci, při autolýze, následkem fixace a řezání tkání. Apostain je metoda založená na průkazu jednovláknových zlomů DNA pomocí monoklonální protilátky, která využívá sníženou stabilitu apoptotické DNA vůči termální denaturaci způsobující její zlomy. Protilátka M30 Cyto- Death detekuje neoepitopy vzniklé při štěpení cytokeratinu 18 kaspázami. Ve srovnání s TUNELem chybí exprese v nekrotických buňkách, neoznačuje však buňky v pokročilých stadiích AP (tělíska). Na rozdíl od některých pilotních studií se nám u M30 (Roche) nepodařilo docílit dostatečnou senzitivitu ani specificitu při detekci AP na mamárních karcinomech. Rutinní, resp. automatizované hodnocení AP vyžaduje ověření a standardizaci dalších metodik.

        Klíčová slova: apoptóza - regulace - detekovat
       

Objednat toto číslo jako - FYZICKÁ OSOBA nebo PODNIKATELSKÝ SUBJEKT

  ZPĚT NA OBSAH  
 
 
| HOME PAGE | KÓDOVÁNÍ ČEŠTINY | ENGLISH VERSION |
©  1998 - 2008 ČESKÁ LÉKAŘSKÁ SPOLEČNOST J. E. PURKYNĚ
Výroba: NT Servis, s.r.o., provozovatel serveru P.E.S. consulting, s.r.o.
WEBMASTER