Využití multiplex PCR metody pro rychlou diagnostiku BCG infekce u dětí
Plíšková L.1, Hrochová K.1, Ryšková L2, Lesná J2, Palička V.1
klinické biochemie a diagnostiky Fakultní nemocnice, Hradec Králové, přednosta prof. MUDr. V. Palička, CSc. Ústav klinické mikrobiologie LF UK, Hradec Králové,2 přednostaprof. MUDr. J. Horáček, CSc. |
|
Souhrn:
Laboratorní metody používané rutinně pro diagnostiku mykobakteriálních infekcí dokáží rozlišit narostlou kulturu Mycobacterium tuberculosis a Mycobacterium bovis BCG, ale vyšetření trvá minimálně 3 týdny a ne vždy je kultivace z klinického materiálu úspěšná. V tomto článku je popsána metoda multiplex polymerázová řetězová reakce (PCR), která umožňuje rychlé rozlišení vakcinačního kmene BCG od ostatních mykobakteriálních druhů komplexu Mycobacterium tuberculosis nejen z narostlé kultury, ale i přímo z klinického materiálu. Pro odlišení se využívá charakteristická delece oblasti RDl v BCG genomu.
Metoda byla zavedena a optimalizována pomocí 12 známých mykobakteriálních kmenů. Metoda multiplex PCR se využívá od roku 1999 v diferenciální diagnostice u dětí s podezřením na postvakcinační komplikace. Od roku 1999 do června 2001 bylo vyšetřeno 18 biologických materiálů.
Multiplex PCR se osvědčila jako rychlá, jednoduchá, citlivá a specifická metoda pro odlišení BCG vakcinačních kmenů.
Klíčová slova:
Mycobacterium bovis BCG, Mycobacterium tuberculosis komplex, multiplex PCR, postvakcinační komplikace
|