Stanovení alantoinu v lidské plazmě
Kanďár R. 1 , Čegan A. 1 , Zuber R. 1 , Skalický J. 2
1 Katedra biologických a biochemických věd, Univerzita, Pardubice 2 Oddělení klinické biochemie, Nemocnice, Pardubice |
|
Souhrn:
Konečným metabolitem odbourávání purinů je u lidí kyselina močová. Bylo zjištěno, že tato látka má významné
antioxidační vlastnosti a může být oxidována mnoha biologicky relevantními oxidanty na alantoin. Z tohoto
důvodu je stanovení alantoinu u lidí navrhováno jako ukazatel míry radikálových reakcí. Alantoin byl stanovo-
ván v lidské plazmě po předchozí derivatizaci jako glyoxylát-2,4-dinitrofenylhydrazon pomocí vysokoúčinné
kapalinové chromatografie na obrácených fázích s gradientovou elucí a detekcí UV-VIS při 365 nm. Vzhledem
k přítomnosti urátu a glyoxylátu v lidské plazmě, které při zvoleném způsobu deriva tizace interferují, jsme
alantoin ze vzorku selektivně oddělili pomocí SPE na AG 1-X8. Analytické parametry stanovení jsou vyhovující:
intraesej s CV 8,7 %, interesej s CV 9,7 % a 90,8 % recovery. Detekční limit je 1 mmol/l alantoinu. Průměrné hladiny
alantoinu stanovené touto metodou u 30 dárců krve jsou v intervalu 2,1 ± 1,3 mmol/l.
Klíčová slova:
alantoin, kyselina močová, oxidační stres, reaktivní sloučeniny kyslíku, HPLC.
|