Souhrn:
Cíl: Náhodně se zjistilo, že některé kmeny Enterococcus faecalis inhibují hemolýzu Staphylococcus
aureus s produkcí β-hemolyzinu. Cílem práce bylo najít optimální podmínky pro vznik tohoto jevu
a pokusit se charakterizovat látku, která za něj odpovídá.
Materiál a metodika: Celkem 91 kmenů z klinických vzorků a 5 sbírkových kmenů E. faecalis a 9
kmenů E. faecium z klinických vzorků bylo testováno na krevním agaru s 5 % ovčích erytrocytů
vyrobeném z těchto základů: Columbia Agar Base (BBL, 211124), Columbia Agar (Bio Mérieux,
51026), Blood Agar Base (Bio-Rad, 64524), Blood Agar Base (Columbia) (Ferosa, 1-034), Columbia
Blood Agar Base (HiMedia, M114), Základ pre krvný agar č. 4 (Imuna), Columbia Agar Base
(Merck, 10455) a Columbia Agar Base (Oxoid, CM331). Exosubstance produkovaná kmeny E. faecalis
byla izolována acetonovou precipitací a podrobena účinku zvýšené teploty a trypsinu.
Výsledky: Ze souboru 91 kmenů E. faecalis z klinických vzorků jich 33 (36 %) produkovalo látku,
která inhibovala hemolýzu vyvolanou β-hemolyzinem S. aureus. Stejný nález vykazovaly též 2 z 5
sbírkových kmenů E. faecalis a žádný kmen E. faecium. K inhibici hemolýzy docházelo na všech
testovaných půdách. Popsaný jev byl nejvýraznější na krevních agarech připravených ze Základu
pre krvný agar č. 4 (Imuna) a Columbia Agar Base (BBL) při pH půd 7,0–7,5 a za kultivace při
37 °C po dobu 24 hod. Stejný účinek měla substance izolovaná z pozitivních kmenů. Tento účinek
zrušilo vystavení látky teplotě 70 °C po dobu 15 min, stejně jako působení 0,1% trypsinu po dobu
30 min. Schopnost kmene inhibovat stafylokokovou hemolýzu korelovala s jeho schopností produkovat
proteázu.
Závěr: Asi třetina kmenů E. faecalis pocházejících z klinických vzorků produkuje substanci pravděpodobně
proteinové povahy a charakteru proteázy, která částečně potlačuje hemolýzu způsobenou
β-hemolyzinem S. aureus.
Klíčová slova:
Enterococcus faecalis – Staphylococcus aureus – inhibice hemolýzy – proteáza.
|