Cíl práce: Cílem práce bylo zavést metody na stanovení dvou markerů pokročilého poškození oxidačním s karbonylovým stresem – produktů pokročilé glykace (AGEs) a produktů pokročilé oxidace proteinů (AOPP), a zjistit jejich hladiny v séru pacientů s diabetes mellitus a u hemodialyzovaných p acientů. Metodika: AGEs byly stanoveny fluorimetricky (excitace 350 nm a emise 440 nm) a jsou uváděny v arbitrárních (fluorescenčních) jednotkách (FU) a v přepočtu na gram proteinu (FU/g). AOPP byly stanoveny spektrofotomet- ricky podle Witko-Sarsatové (absorbance při 340 nm) a jsou vyjádřeny v jednotkách chloraminu (mmol/l). AGEs i AOPP jsou v séru zamraženém na –80 °C stabilní po dobu 3 měsíců. Variační koeficient metody stanovení AGEs je 3,21 % a metody stanovení AOPP 3,31 %. Výsledky: AGEs i AOPP jsou zvýšeny u diabetiků (AGEs 3,39±0,8x10 5 FU vs 2,88±0,52x10 5 FU u dárců, p < 0,001, AOPP 115,43±64,54 mmol/l vs 69,07±35,83 mmol/l u dárců, p < 0,001) a ještě více u dialyzovaných pacientů (AGEs 1,03±0,24x10 6 FU, p < 0,001 vs dárci i diabetici, AOPP 252,99±84,9 mmol/l, p < 0,001 vs dárci i diabetici). Nalezli jsme těsnou korelaci mezi AGEs a AOPP, která je nejvíce patrná u diabetiků (r = 0,77). Zajímavým nálezem je také korelace AGEs s věkem pouze u dárců krve – mužů (r = 0,47) a vyšší hladiny AOPP u dárců krve mužů než u žen (78,60±44,01 mmol/l vs 57,20±16,31mmol/l, p < 0,05). Závěr: Obě metody jsou rychlé, jednoduché a ekonomicky i časově nenáročné. Vyžadují ovšem potřebné přístrojové vybavení. Stanovení AGEs a AOPP jako markerů poškození u řady chorob je m ožné využít v klinické praxi.

        Klíčová slova: oxidační stres, karbonylový stres, produkty pokročilé glykace (AGEs), produkty pokročilé oxidace (AOPP), spektrofotometrie, fluorimetrie.