Použití jednokrokové polymerázové řetězové reakce
k detekci Borrelia burgdorferi sensu lato a jejich
genomospecies u klíšťat Ixodes ricinus
Bašta J. 1 , Hulínská D. 1 , Plch J. 1 , Daniel M. 2
1 Centrum epidemiologie a mikrobiologie, Státní zdravotní ústav, Praha 2 Institut postgraduálního vzdělávání ve zdravotnictví, Praha |
|
Souhrn:
Cílem práce bylo zavedení screeningové PCR do diagnostiky Borrelia burgdorferi sensu lato ve
vektoru, výběr nejvhodnějšího primeru derivovaného z chromosomální DNA a detekce jednotlivých
genomospecies.
Citlivost primerů popsaných v literatuře (LD, 16S, Wk, 5S-23S) byla testována pomocí různého
množství DNA kmenů borelií. Nejcitlivější primer, LD, byl použit pro detekci borelií ve vektoru.
Klíšťata byla sbírána v městských parcích od roku 1995 do roku 1997. Celkem bylo vyšetřeno 635
klíšťat. Pozitivita souboru se v různých letech lišila: 9,2 % v roce 1995, 3,4 % v roce 1996 a 4,5 % v roce
1997. Dospělá klíšťata byla výrazně více infikována než nymfy. Borrelia garinii na lokalitě převládá,
Borrelia burgdorferi sensu stricto nebyla dosud detekována. Smíšená infekce Borrelia garinii/Bor-
relia afzelii byla nalezena v roce 1997 v jednom vzorku (samice klíštěte).
Polymerázová řetězová reakce (PCR) je citlivá a specifická metoda, která je vhodná ke zjištění
promořenosti klíšťat boreliemi. S poměrně vysokou citlivostí umožňuje rozlišit jednotlivé genomo-
species Borrelia burgdorferi ve vektoru. Před jejím použitím je nutno testovat citlivost reakce, a to
i v přítomnosti klíšťové DNA.
Klíčová slova:
klíště – lymeská borelióza – PCR – Borrelia.
|