Abstrakt:
Východisko: Reziduální leukemické buňky, jsou-li přítomny v autologní kostní dřeni či CD34
+
koncentrátech
progenitorových buněk periferní krve, mohou zvýšit riziko relapsu po autotransplantaci. Je popsáno využití nového
principu používaného ve fotodynamické terapii, jímž je indukce syntézy endogenního fotosenzibilizátoru, protopor-
fyrinu IX, v nádorových buňkách, aplikací jeho metabolického prekurzoru, 5-aminolevulové kyseliny, ke specifické
destrukci leukemických buněk.
Metody a výsledky. Stanovením viability buněk redukcí tetrazoliové soli MTT, průtokovou cytometrií s použitím
propidium jodidu a stanovením buněčné proliferace inkorporací bromodeoxyuridinu jsme studovali účinek fotody-
namické terapie, založené na aplikaci 5-aminolevulové kyseliny, na buňky leukemických linií HL60 (promyelocy-
tární leukémie), HEL (erytroleukémie), DAUDI (B-buněčná leukémie), JURKAT (T-buněčný lymfom), na blastické
buňky pacientů s akutní myeloidní leukémií a na normální lymfocyty a progenitorové buňky normální kostní dřeně.
V in vitro experimentech fotodynamická terapie založená na aplikaci 5-aminolevulové kyseliny (1 mM, 4 h, 18
J/cm
2
) snížila počty viabilních leukemických buněk o více než dva řády (s výjimkou buněk HEL) a eliminovala
blastické buňky v preparátech mononukleárních buněk u šesti ze sedmi pacientů s akutní myeloidní leukémií. Naproti
tomu viabilita normálních klidových lymfocytů byla postižena jen nepatrně (nárůst počtu nekrotických buněk po
fotodynamické terapii ze 6 na 11 % ) a klonogenní aktivity progenitorových buněk normální kostní dřeně byly sníženy
na přijatelnou míru (CFU-GM na 60 % a BFU-E na 55 % původní aktivity).
Závěry: Fotodynamická terapie založená na aplikaci 5-aminolevulové kyseliny je perspektivní metodou pro
specifickou destrukci leukemických buněk v autologních transplantátech.
Klíčová slova:
leukémie, fotodynamická terapie, 5-aminolevulová kyselina, autologní transplantace, čištění kostní dřeně.
|