Abstrakt:
Východisko. Průkaz membránových buněčných molekul pomocí imunofenotypizace patří v současnosti nedílně
do laboratorní diagnostiky krevních malignit. Imunochemický průkaz intracelulárních molekul je nezbytný v těch
případech, kdy je membránová výbava maligních buněk chudá, nebo pokud není výsledek průkazu membránových
molekul jednoznačný (např. ektopická exprese povrchových molekul jiné linie, nebo hybridní leukémie).
Metod a výsledky. Pro stanovení nukleárních a cytoplazmatických molekul se nám osvědčila metodika používající
k fixaci buněk 4% roztok paraformaldehydu v pufrovaném fyziologickém roztoku, permeabilizace je zajišťována
lyzačním roztokem G (Becton Dickinson) a následným promýváním suspenze v pufrovaném fyziologickém roztoku
s přídavkem Tweenu 20. Tento jednoduchý postup jsme použili k průkazu intracelulárních molekul nutných pro
určení liniové příslušnosti u všech námi dosud vyšetřených případů krevních malignit.
Klíčová slova:
imunofenotypizace, průtoková cytometrie, cytoplazmatické molekuly, jaderné molekuly.
|